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鸭γ干扰素(IFN-γ)elisa试剂盒洗涤方法
点击次数:35 发布时间:2019-11-06

洗涤
       洗涤在ELISA试剂盒过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。ELSIA就是

靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相

抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯

58彩票app等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。

58彩票app可以说在ELISA操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格

按要求洗涤,不得马虎。
       
洗涤液多为含非离子型洗涤剂的中性缓冲液。聚苯乙烯载体与蛋白质的结合是疏水性的,非离

子型洗涤剂既含疏水基团,也含亲水基团,其疏水基团与蛋白质的疏水基团借疏水键结合,从

而削弱蛋白质与固相载体的结合,并借助于亲水基团和水分子的结合作用,使蛋白质回复到水

溶液状态,从而脱离固相载体。洗涤液中的非离子型洗涤剂一般是吐温20,其浓度可在

0.05%-0.2%之间,高于0.2%时,可使包被在固相上的抗原或抗体解吸附而减低试验的灵敏度。
       
洗板时注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释,应按要求稀释,所用的水电导率

zui好在1。5us/cm之下,洗液如果结晶应待其融解后配制。保证洗板浸泡时间为40秒左右,孔内

液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好,手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。

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