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SOD 酶联免疫分析试剂盒对于标本有何要求?
点击次数:27 发布时间:2019-10-17
   SOD 酶联免疫分析试剂盒对于标本有何要求?
  SOD 酶联免疫分析试剂盒类型和操作步骤
  ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂:
  ①固相的抗原或抗体,
  ②酶标记的抗原或抗体,
  ③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件,可设计出各种不同类型的检测方法。
  (一)双抗体夹心法、
  (二)一步法、
  (三)间接法测抗体、
  (四)竞争法。
  SOD 酶联免疫分析试剂盒标本要求
  1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
  2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
  SOD 酶联免疫分析试剂盒操作步骤
  1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可向客服索取说明书》》 在线索取
  2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中 先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
  3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
  4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
  5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  7.温育:操作同3。
  8.洗涤:操作同5。
  9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
  10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
  11. 测定:SOD 酶联免疫分析试剂盒以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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